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人類及動物卵子和胚胎玻璃化冷凍 – 更好的冷凍載體及技術

 

人類及動物卵子和胚胎玻璃化冷凍 – 更好的冷凍載體及技術

       韋拓生物的玻璃化冷凍液和解凍液在胚胎實驗室中越來越受歡迎。然而,傳統(tǒng)的玻璃化冷凍載體 – ?;瘍龃婀埽ǔㄩ_式拉管,以下簡稱OPS)卻不是胚胎實驗室中更常見的冷凍載體。原因很簡單:雖然OPS是首先發(fā)明的,但其它冷凍載體可能有著更好的工業(yè)背景或更多的宣傳。多數(shù)人類胚胎實驗室只聽說過薄片式的高速玻璃化冷凍法,幾乎很少考慮這種方法是否還存在替代方案。在有著可靠的理證據(jù)支撐前,人們不會冒險用一個新的方法來取代現(xiàn)有的方法。

       現(xiàn)在有很好的理由考慮改變。

韋拓生物的OPS有著高標準的生產體系,在全球范圍內銷售。OPS有著多種多樣的學習和使用方式,包括手冊、視頻、現(xiàn)場研討會、在線咨詢以及獨具創(chuàng)意的教學APP,該APP詳細介紹了冷凍、儲存和解凍的全過程。

      與其他冷凍載體相比, OPS在裝載和排出樣品的操作上更加容易,不少玻璃化冷凍領域專家也對這點表示驚嘆。并且對于年輕的胚胎學家來說,成功并持續(xù)地使用OPS也更容易,學習和練習的時間也更短。

      請相信這些觀點。此外,盡量去避免可能存在的誤解:

       1. 不要認為OPS是 “對傳統(tǒng)技術的修改” 。事實恰恰相反,OPS是第一個專門用于高速玻璃化冷凍的工具和方法。其他工具只是對其結構和技術進行了調整。至少可以說,這些調整并不總像想象中成功。

       2. 就樣本的裝載、冷凍、解凍和排出而言,OPS方法與其他工具不同,但卻更容易,甚至在這些步驟的時間選擇上都是獨一無二的。詳細的操作方法可以再我們的輔助材料中相關描述。請花幾分鐘去理解它們,再花幾個小時去學習它們。

? ? ? ?結果會證明你的選擇是正確的。第一例經(jīng)玻璃化冷凍人類卵子、原核期及2-細胞期胚胎誕生的嬰兒均使用了OPS方法。OPS也成功應用于動物物種的卵母細胞和胚胎的首次玻璃化冷凍,包括那些沒有透明帶或經(jīng)過各種操作的胚胎。

? ? ?此外,與其他玻璃化冷凍方法相比,OPS方法具有一些獨特的優(yōu)點:

? ? ? 1. 卵母細胞和胚胎在OPS管內比在薄片上更能避免機械損傷;

? ? ? 2. 樣品不會附著在薄片上,而是被冷凍液包裹,在解凍后可輕易排出;

? ? ? 3. 盡管裝載的過程迅速,但液體的體積是恒定的:在確保所需的冷凍和升溫速率的同時,保護樣品免受蒸發(fā)和滲透性損傷。

? ? ? ?一個意想不到的信息是,有觀點認為在裝載卵母細胞/胚胎時,不應該盡量減小液滴量,并且在社交平臺上進行了推廣。而到目前為止,薄片式載體的推薦操作方式仍是建議去除大部分液體,該方式被廣泛推廣,并在全球范圍內得到了一定認可。

? ? ? ?事實上,并不是所有人都認可去除大部分液體這種方式。一個純粹但確有效的經(jīng)驗:缺少溶液或扁平的液滴可能導致一個不太理想的結果,這可能來自滲透性損傷。蒸發(fā)可誘導液體濃度的升高,特別是在層流環(huán)境下。

? ? ? ?我們不得不注意到,這些新的推薦方式,將液滴保持在薄片上的高處,似乎是在重復發(fā)明,因為OPS總是使用更大的液滴和液柱,以完全消除平坦的液滴可能對卵母細胞/胚胎的傷害。

? ? ? ?這是一個歷經(jīng)24年的建議,因為OPS最初發(fā)表于1998年。